免疫熒光的注意事項(xiàng)中,對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置尤為關(guān)鍵:其一,內(nèi)源性組織背景對(duì)照,某些細(xì)胞和組織存在固有的生物學(xué)特性,其有可能會(huì)引發(fā)背景熒光,進(jìn)而對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾,像色素脂褐質(zhì)便是典型例子。所以,在進(jìn)行一抗孵育之前,務(wù)必要對(duì)樣品展開(kāi)細(xì)致觀(guān)察,以切實(shí)保障抗原自身不存在信號(hào)。比如,若沒(méi)有進(jìn)行這樣的觀(guān)察和確認(rèn),可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤地將背景熒光當(dāng)作是目標(biāo)抗原的信號(hào),從而得出不準(zhǔn)確的結(jié)論。其二,陽(yáng)性對(duì)照,采用被確認(rèn)含有待測(cè)抗原的組織或細(xì)胞,與待測(cè)標(biāo)本實(shí)施統(tǒng)一處理,其結(jié)果理應(yīng)呈現(xiàn)陽(yáng)性,如此便能夠證實(shí)待測(cè)抗原有一定的活性,同時(shí)也能表明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的試劑以及方法都是可靠的。比如說(shuō),如果陽(yáng)性對(duì)照未能呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,那就需要對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行仔細(xì)檢查和反思,以確定問(wèn)題所在。其三,陰性對(duì)照,這與陽(yáng)性對(duì)照恰恰相反,是利用明確不含有待測(cè)抗原的細(xì)胞或組織切片進(jìn)行染色,如果結(jié)果為陰性,那么就能夠排除在染色過(guò)程中由于非特異性染色而導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果。例如,若陰性對(duì)照出現(xiàn)了陽(yáng)性信號(hào),那就說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能存在某些問(wèn)題導(dǎo)致了非特異性結(jié)合,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)條件和步驟進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。免疫組化試劑盒適用于多種組織染色濕度。SERPINF1免疫熒光染色
在慢性阻塞性肺疾?。–OPD)的研究中,多重免疫組化有助于剖析疾病的病理生理過(guò)程。可以標(biāo)記氣道上皮細(xì)胞的標(biāo)志物,如細(xì)胞角蛋白,同時(shí)標(biāo)記炎癥細(xì)胞的標(biāo)志物,如 CD8 + T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞,以及與氣道重塑相關(guān)的生長(zhǎng)因子,如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 - β1(TGF - β1)。在 COPD 患者中,氣道炎癥和重塑是主要特征。通過(guò)觀(guān)察這些標(biāo)志物的變化,可以了解氣道上皮細(xì)胞的損傷情況、炎癥細(xì)胞在氣道中的浸潤(rùn)和分布,以及 TGF - β1 是如何促進(jìn)氣道平滑肌細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)沉積,導(dǎo)致氣道重塑的。Aggrecan免疫熒光IF免疫熒光雙標(biāo)檢測(cè),明確雙分子定位信息,加速研究步伐。
**微環(huán)境是一個(gè)復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng),包含腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種成分,以及細(xì)胞因子、趨化因子等多種生物分子。利用多重免疫熒光和多色免疫熒光技術(shù),我們可以對(duì)**微環(huán)境中的多種成分進(jìn)行標(biāo)記。例如,用綠色熒光標(biāo)記腫瘤細(xì)胞,紅色熒光標(biāo)記**相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs),藍(lán)色熒光標(biāo)記**血管內(nèi)皮細(xì)胞。這樣,在**組織切片上就可以直觀(guān)地看到腫瘤細(xì)胞與周?chē)庖呒?xì)胞和血管的空間關(guān)系。同時(shí),我們還可以標(biāo)記與腫瘤免疫逃逸相關(guān)的分子。比如,用黃色熒光標(biāo)記腫瘤細(xì)胞表面的程序性死亡配體-1(PD-L1),紫色熒光標(biāo)記浸潤(rùn)在**組織中的T細(xì)胞表面的程序性死亡受體-1(PD-1)。通過(guò)觀(guān)察這些標(biāo)記分子的表達(dá)情況以及它們之間的相互作用,能夠深入了解腫瘤細(xì)胞是如何通過(guò)與免疫細(xì)胞的相互作用來(lái)逃避免疫監(jiān)視的。這對(duì)于開(kāi)發(fā)基于**微環(huán)境的免疫治療方法,如免疫檢查點(diǎn)抑制劑的應(yīng)用,具有重要的指導(dǎo)意義。
在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的研究中,多重免疫組化有助于揭示疾病的多系統(tǒng)損害機(jī)制??梢詷?biāo)記皮膚組織中的自身抗體標(biāo)志物,如抗核抗體(ANA)的抗原,同時(shí)標(biāo)記皮膚細(xì)胞的標(biāo)志物,如角蛋白,以及皮膚中的免疫細(xì)胞標(biāo)志物,如 CD4 + T 細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞等。在腎臟組織中,可以標(biāo)記抗雙鏈 DNA 抗體(dsDNA)的抗原,同時(shí)標(biāo)記腎小球細(xì)胞標(biāo)志物,如足細(xì)胞蛋白,以及腎內(nèi)免疫細(xì)胞標(biāo)志物,如 CD8 + T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。SLE 患者的自身抗體可累及多個(gè)系統(tǒng),通過(guò)觀(guān)察這些標(biāo)志物在不同組織中的分布和相互關(guān)系,可以了解自身抗體是如何與組織細(xì)胞結(jié)合,引發(fā)免疫炎癥反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致皮膚紅斑、腎臟損害等多系統(tǒng)病變的。在免疫細(xì)胞研究方面,免疫熒光可以追蹤免疫細(xì)胞在組織中的遷移路徑和活化狀態(tài),深入了解免疫應(yīng)答的過(guò)程。
在病毒性肝炎的研究中,肝臟組織中的免疫反應(yīng)對(duì)于疾病的發(fā)展和轉(zhuǎn)歸至關(guān)重要。利用多重免疫熒光,我們可以用不同顏色標(biāo)記肝細(xì)胞中的肝炎病毒抗原、免疫細(xì)胞(如T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)以及細(xì)胞因子。例如,用綠色熒光標(biāo)記乙肝病毒表面抗原(HBsAg),紅色熒光標(biāo)記肝組織中的CD8+T細(xì)胞,藍(lán)色熒光標(biāo)記干擾素-γ(IFN-γ)。這樣就能直觀(guān)地看到乙肝病毒在肝細(xì)胞中的分布、免疫細(xì)胞對(duì)病毒感染細(xì)胞的攻擊情況以及細(xì)胞因子在免疫應(yīng)答中的作用。在肝臟纖維化的研究方面,多色免疫熒光可用于標(biāo)記肝星狀細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)成分以及與纖維化相關(guān)的生長(zhǎng)因子。比如,用綠色熒光標(biāo)記肝星狀細(xì)胞中的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA),紅色熒光標(biāo)記膠原蛋白,藍(lán)色熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)。通過(guò)觀(guān)察這些標(biāo)記成分的分布和變化,可以深入研究肝臟纖維化的發(fā)生機(jī)制,包括肝星狀細(xì)胞的活化、細(xì)胞外基質(zhì)的沉積以及生長(zhǎng)因子的調(diào)控作用。免疫細(xì)胞研究產(chǎn)品適用于細(xì)胞表面標(biāo)記檢測(cè)。Aggrecan免疫熒光IF
前沿免疫熒光染色,展現(xiàn)病理研究新風(fēng)貌。SERPINF1免疫熒光染色
在胚胎神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中,神經(jīng)元的分化、遷移和神經(jīng)回路的形成是復(fù)雜而有序的過(guò)程。利用多色免疫熒光,我們可以用不同顏色標(biāo)記神經(jīng)元的不同發(fā)育階段標(biāo)志物。例如,用綠色熒光標(biāo)記神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)志物,紅色熒光標(biāo)記正在分化的神經(jīng)元的標(biāo)志物,藍(lán)色熒光標(biāo)記已經(jīng)成熟的神經(jīng)元的標(biāo)志物。這樣就能在胚胎腦組織切片上觀(guān)察到神經(jīng)干細(xì)胞是如何逐漸分化為成熟神經(jīng)元,以及這些神經(jīng)元如何遷移到特定位置形成神經(jīng)回路的。同時(shí),我們還可以用不同顏色標(biāo)記神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中的信號(hào)分子和細(xì)胞外基質(zhì)成分。比如,用黃色熒光標(biāo)記神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,紫色熒光標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞遷移過(guò)程中依賴(lài)的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白。通過(guò)觀(guān)察這些標(biāo)記成分與神經(jīng)元的相互關(guān)系,可以深入研究神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的調(diào)控機(jī)制,包括信號(hào)分子對(duì)神經(jīng)元分化和遷移的誘導(dǎo)作用,以及細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞定位的支持作用。SERPINF1免疫熒光染色