鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。B.含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項(xiàng)型在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。鼠尾肌腱膠原蛋白I(rattailtendoncollagentypeI)根據(jù)Birkedal-Hansen方法,經(jīng)過(guò)醋酸(HAc)抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得。注意事項(xiàng):在室溫下pH 中性時(shí)可迅速成膠,在操作過(guò)程中要 盡量保持低溫。北京鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時(shí)進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測(cè)量纖毛擺動(dòng)頻率。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見(jiàn)上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開(kāi);掃描電鏡下見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見(jiàn)微絨毛;透射電鏡下可見(jiàn)纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動(dòng)頻率是相同的;同一來(lái)源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動(dòng)頻率是相同的。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對(duì)纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。鄭州鼠尾膠原直銷廠家鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來(lái)的物質(zhì)。
生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡(jiǎn)化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過(guò)程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無(wú)菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在工業(yè)應(yīng)用方面,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥。它還可以用來(lái)制造一種凝膠,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基。此外,還可以把它當(dāng)膠水使用。在化妝品行業(yè),鼠尾膠原蛋白可當(dāng)作沐浴液和肥皂中的凝膠。它還用于生產(chǎn)能減少皺紋和改善皮膚質(zhì)量的面霜或護(hù)膚霜。不過(guò),用于撫紋,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從牛或豬提取。不過(guò),用于撫紋,或使嘴唇顯得更大更飽滿的注射用膠原蛋白通常是從牛或豬提取。方法制作鼠尾膠原,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。
三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過(guò)程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來(lái)中和。需要的溶液(均需要無(wú)菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。制備鼠尾膠原:手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的,折斷尾骨后拉出尾腱。武漢鼠尾膠原哪里買
在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。北京鼠尾膠原哪家便宜
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異。止血材料是常見(jiàn)的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn);同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除,導(dǎo)致傷口潰爛,或者因?yàn)檎掣綄?dǎo)致傳染;再次就是止血材料多是通過(guò)吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來(lái)生產(chǎn)的?,F(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α-氰基丙烯酸酯類組織膠、醫(yī)用止血明膠等,但是都有各自的缺點(diǎn)。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高;α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過(guò)程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì);醫(yī)用止血明膠黏附性較差,易脫落,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。北京鼠尾膠原哪家便宜