HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍(lán)化液殘留過多;(3)切片太??;(4)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍(lán)化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過長,因?yàn)楹嗟牡蜐舛纫掖紩?huì)將伊紅的顏色分化掉。HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟。安徽值得信賴的HE染色檢測
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本、使用*****的技術(shù)方法。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來。黑龍江專業(yè)的HE染色哪家好骨組織HE染色的操作流程。
HE染色在**染色中的應(yīng)用,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,生長迅速,轉(zhuǎn)移較早,五年存活率*為1%-2%,預(yù)后非常差。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),包括巢狀、小梁狀、實(shí)性片狀,常有菊形團(tuán)形成,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,一般小于三個(gè)靜止的淋巴細(xì)胞,呈圓形、卵圓形或短梭形,胞質(zhì)稀少,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁缺乏或不明顯,核分裂象每十個(gè)高倍視野大于十一個(gè),常見大片狀壞死。
HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項(xiàng):多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會(huì)被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過24小時(shí)。多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或組織樣品中,固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時(shí)仍會(huì)有殘留,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。HE染色注意事項(xiàng)以及常規(guī)的流程解析。
HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過高、過熱,在石蠟停留的時(shí)間過長;(2)固定時(shí)間太短,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策:理論上來說,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過長時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng)。江西質(zhì)量好的HE染色外包
心臟組織HE染色如何觀察。安徽值得信賴的HE染色檢測
HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,紅藍(lán)適度,透明潔凈,封裱美觀。安徽值得信賴的HE染色檢測